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簡(jiǎn)要描述：DH10B Chemically Competent Cell/Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞保存條件：-80℃
產(chǎn)品型號(hào)：DH10B 產(chǎn)品品牌：Abnbio更新時(shí)間：2024-03-21訪 問(wèn) 量：207
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詳細(xì)介紹
| 品牌 | Abnbio | 貨號(hào) | ABG018-50 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 50支100ul | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 細(xì)胞培養(yǎng) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
DH10B Chemically Competent Cell
基因型：
F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG
簡(jiǎn)要說(shuō)明：
DH10B菌株來(lái)源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC及mrr突變使DH10B菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA（Therefore , genomic DNA , both prokaryotic andeukaryotic, can be cloned efficiently in DH10B）。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。φ80dlacZ?M15 marker的存在使DH10B可用于藍(lán)白斑篩選，rpsL賦予其LIAN霉素抗性。
5TM系列DH10B感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>108cfu/μg。
操作說(shuō)明：
1.DH10B感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中），加入目 的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無(wú)菌培養(yǎng)基，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少13h。
注意事項(xiàng)：
1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。
2.混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
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